细胞吹打用巴氏吸管、移液管还是枪？有何区别？如何操作？

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细胞吹打：细胞培养是个技术活，其中各个步骤的操作都需十分谨慎规范，否则稍有不慎就要面临「再来一次」的风险。就拿吹打细胞来讲，操作起来并不复杂，但如果吹打技巧掌握不好，细胞很容易遭受机械损伤和剪切力影响，从而导致细胞受损严重、状态变差或者直接死亡。

 

1 机械损伤 & 剪切力

 

机械损伤主要是指枪头或者吸管的刮擦、细胞间碰撞导致的细胞损伤。如果要减少这部分损伤，首先应该尽量减小吹打力度，力度只要保证能够吹下吹散细胞就行。大部分悬浮细胞不需要很大力度吹打即会散开，而贴壁细胞一定要消化到细胞可以轻轻吹下再终止消化。消化不完全就暴力吹下的细胞往往状态都不会太好。

 

剪切力是指物体横截面收到外力影响，沿外力方向相对移动的现象，这个外力就叫做剪切力。如果培养基里有很多气泡，细胞处在气泡与培养基之间，当气泡破碎时，细胞瞬间会受到强大的剪切力影响从而导致细胞碎裂。

 

那么我们在进行细胞吹打的时候应该选择哪种工具、需要掌握怎样的技巧呢？

 

2 吹打工具的选择

 

其实在吹打工具的选择上会根据实验人员的研究对象、使用耗材的不同以及使用习惯而定。

 

在使用移液枪进行细胞吹打时，因为枪口较细，且冲击力大，可以把贴的很牢的细胞吹下来，把细胞吹成悬液的时候，用枪也会吸得更均匀。不过有的时候贴的很牢的细胞可能是消化不够，这种情况下即使用枪可以把细胞吹打下来，对于细胞的损伤作用也是非常大的。在用枪进行吹打的时候要格外小心，如果吸得太快，枪头没放好位置，可能会一下把液体吸得超过了枪头弄到枪里面，从而导致污染。其次是注意枪头刮擦的问题，枪头与细胞层接触甚至研磨会导致细胞直接死亡。枪头直接接触瓶底不仅会刮伤细胞，还可能划伤瓶底产生划痕，有划痕的这部分是很难再有细胞生长的。

 

枪比较适合用于小的瓶或皿，大瓶大皿的话由于液体多，面积体积大，用枪操作很不方便。枪的话一般是在 35 mm 的皿、孔板培养的细胞培养中采用的比较多，此时培养的面积比较小通常无法用移液管进行操作。而像 60 mm 的皿用 5 ml 移液管操作还是比较方便的。

 

巴氏管因为管子比较软，相对移液管而言吹打力度更温和些，对于有些细胞来说可能比较难以吹打成细胞悬液。另外 3 ml 巴氏管在吹打比较大体积的细胞悬液（比如 10 ml）时因为体积相差太大，也增加了吹打成单细胞或者细胞悬液的难度。

 

3 避免气泡产生

 

但不管是移液管、枪、巴氏管吹打细胞时，都要尽量避免产生气泡，气泡产生一方面增加了污染的概率，另一方面气泡破了后的瞬间对细胞产生的剪切力较大，会对细胞造成伤害。吹打时掌握合适力度更容易控制培养基流速，避免涡流产生气泡。吹打用的培养基不能太少，否则在吹打时容易打入空气混入气泡。

 

4 安进特——细胞吹打相关耗材

△  安进特枪头
 

△  安进特移液管

 

△  安进特吸管